傘枝梨頭霉PCR試劑盒采用優化的超順磁性磁珠和緩沖體系,可便捷回收PCR產物中的DNA,有效去除引物二聚體、dNTP、無機鹽及蛋白質等雜質,整個過程操作簡單快速,20分鐘即可完成實驗。本產品具有回收DNA的片段,回收率高,DNA純度高等特點,回收的DNA可直接用于酶切、測序、PCR等后續操作。
傘枝梨頭霉PCR試劑盒的樣品DNA的制備:
1、用自選方法純化樣品的DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
2、如果有N個樣品,則需要進行N+2個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
3、配制溶液A工作液。如果待測樣品數量為其他數字,配制的溶液A工作液的體積需要做相應的調整。
4、在標記好的N+2個離心管中,加入1-5mg固體樣品(半粒芝麻大小)或5uL液體樣品待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入5uL陽性對照,在樣品制備陰性對照中加入5uL水。
5、在每個管中加入100uL溶液A工作液,確保固體樣品被溶液淹埋,如果是液體樣品則震蕩混勻。
6、95℃保溫10分鐘。
7、待冷卻到常溫后加入10uL溶液B并混勻得DNA釋放液。每個樣品得到的DNA釋放液足夠進行50-100次PCR。
本試劑盒用于病料組織中病毒的檢測,具有與柱提取方法相當的敏感性,且用本試劑盒可免除組織研磨和核酸提取步驟,加快檢測流程,加大檢測能力,減少實驗室污染。前期研究結果顯示,對于動物各內臟、耳、尾等組織,均不需要研磨而直接裂解。也可以對含有骨髓的骨組織,直接用試劑盒處理和擴增。