產品及特點:
1. 產品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
產品名稱 | 瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Mycobacterium malmoenesPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒多少錢低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,產品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
硫酸鋯/硫酸鋯四水合物/硫酸鋯(IV)四水合物/Zirconium sulfate tetrahydrateSP,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7446-31-3RT
一氧化錫/氧化亞錫/氧化錫(II)/Tin(II) oxideAR,90%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,21651-19-4RT
二氧化錫/氧化錫/錫灰/氧化錫/氧化高錫/Tin(IV) oxideCP,99.5%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,18282-10-5RT
硫酸亞錫/硫酸錫/硫酸亞錫(II)/硫酸錫(II)/Tin(II) sulfateAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7488-55-3RT
草酸亞錫/乙二酸亞錫/乙二酸亞錫(II)鹽/草酸錫/草酸錫(II)/Tin(II) oxalateCP,98.5%1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,814-94-8RT
碳化鎢/一碳化鎢/碳化鎢粉/炭化鎢/Tungsten carbideAR,99.5%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,12070-12-1RT
三氧化鎢/氧化鎢/鎢酸酐/氧化鎢(VI)/Tungsten(VI)oxideAR,99%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1314-35-8RT
氟化鈰/三氟化鈰/氟化亞鈰/氟化鈰(Ⅲ)/Cerium(III) fluoride4N,99.99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7758-88-5RT
氧化鈰/二氧化鈰/氧化高鈰/玻璃白/鈰土/氧化鈰(IV)/Cerium(IV) oxide3.5N250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1306-38-3RT
硫酸亞鈰/八水合硫酸亞鈰/硫酸亞鈰(III)/硫酸鈰(III)/Cerium(III) sulfate octahydrateCP,97%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10450-59-6RT
硫酸亞鈰(III)/硫酸鈰(III)/無水硫酸亞鈰(III)/無水硫酸鈰(III)/無水硫酸亞鈰/無水硫酸鈰/Cerium(III) sulfateAR,99%50克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13454-94-9RT
硫酸鈰/硫酸高鈰/硫酸鈰四水合物/硫酸鈰(Ⅳ)四水合物/Cerium(IV) sulfate tetrahydrateAR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10294-42-5RT
二氧化鈦/鈦酐/氧化鈦(IV)/板鈦礦/鈦鋇白/Titanium(IV) oxideCP,98%500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13463-67-7RT
硫酸亞鈦/硫酸亞鈦溶液/Titanium(III) sulfate solutionCP,15%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,19495-80-8RT
瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒多少錢5-(Chloromethyl)-1,2,3-trimethoxybenzene 質量規格:>98%,FGFR抑制劑
NA 質量規格:>90%
2-Bromo-9-fluorenone 質量規格:HPLC≥98%,標準品
LINOELAIDIC ACID 質量規格:HPLC≥98%,標準品
(R)-(-)-2,2,2-TRIFLUORO-1-(9-ANTHRYL)ETHANOL 質量規格:HPLC≥98%,標準品
TRIDODECYLAMINE 質量規格:HPLC≥98%,標準品
2-Chloro-6-methylnicotinic acid 質量規格:HPLC≥98%,標準品
3-Chloropyridine 質量規格:>97%,BR
技術特點:
1產品僅用于科研準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。
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